发布地方标准 DB143007—2024ICS11.120.20 CCSC30 化妆品用原料重组人源化胶原蛋白的鉴定 Identificationprocessofrecombinanthumanizedcollagen 2024-05-29发布 2024-08-28实施 DB143007—2024 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由山西锦波生物医药股份有限公司提出。 本文件由山西省化妆品标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：山西锦波生物医药股份有限公司，山西省检验检测中心（山西省标准计量技术 研究院）。 本文件主要起草人：王建、于玉凤、卢彦宏、孙丹丹、何振瑞、李喜梅、张朝敏、张永健、刘 欣。 DB143007—2024 1化妆品用原料重组人源化胶原蛋白的鉴定 1范围 本文件适用于化妆品用原料重组人源化胶原蛋白的鉴定。 本文件规定了化妆品用原料重组人源化胶原蛋白的鉴定项目、材料和设备、鉴定方法、结果判定 等。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 YY/T1888-2023重组人源化胶原蛋白 中华人民共和国药典（2020年版） 3术语和定义 YY/T1888-2023界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 肽段覆盖率（氨基酸序列覆盖度）Peptidecoverage 肽段覆盖率（氨基酸序列覆盖度）是指检测到的肽段的氨基酸数量占该蛋白质总氨基酸数量的比 例。蛋白质经过酶切后，采用LC-MS进行检测，鉴定到的酶切后肽段占理论序列氨基酸数量的比例。 3.2 末端氨基酸序列Terminalaminoacidsequence 末端氨基酸序列是指蛋白质序列中N端和C端的一段序列。 4原理 选用适宜的蛋白酶对重组人源化胶原蛋白进行酶解，酶解后的肽段采用高效液相色谱-串联质谱仪 检测肽段覆盖率和氨基酸序列。依据样品氨基酸序列与人胶原蛋白某亚型序列匹配度判断是否为重组 人源化胶原蛋白。 5材料和设备 5.1试剂和材料 a)水：GB/T6682，一级； b)碳酸氢铵：纯度≥99.5%；