ICS 65.020.01 B 05 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB13/T 1472—2011 苜蓿耐盐性鉴定技术规程 Rules for identifying of alfalfa salt tolerance 2011 - 11 - 15 发布 河北省质量技术监督局 2011 - 11 - 30 实施 发 布 DB13/T 1472—2011 前 言 本标准依据 GB/T 1.1—2009 的规定编写。 本标准由沧州市质量技术监督局提出。 本标准起草单位：沧州市农林科学院。 本标准主要起草人：阎旭东、岳明强、徐玉鹏、刘艳昆、赵忠祥、黄素芳、王秀玲、芮松青、 刘维江、刘振敏、肖宇。 I DB13/T 1472—2011 苜蓿耐盐性鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了苜蓿的耐盐性鉴定方法及评价指标。 本标准适用于苜蓿种质资源和育种材料的耐盐性鉴定及评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 2930.1 牧草种子检验规程 扦样 GB/T 2930.2 牧草种子检验规程 净度分析 GB/T 2930.4 牧草种子检验规程 发芽试验 DB13/T 945—2008 紫花苜蓿生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 耐盐性 指植物能耐受高浓度盐类环境而生长发育的性质。 3.2 1/2 日本园试通用配方营养液 指采用日本园试通用配方营养液普通剂量的1/2。 3.3 活苗数 指经过30 d盐处理培养仍正常存活的幼苗数。 3.4 对照处理 品种内不加NaCl胁迫的处理。 3.5 性状相对值 为消除各品种本身发芽率的不同所带来的生长误差，其值为某处理下，该性状值与对照处理值的比 值，具体各计算公式见5.1.2。 3.6 对照品种 为比较鉴定材料与公认耐盐品种的差异而设定的对照品种，本规程中以中苜一号作为对照品种。 1 DB13/T 1472—2011 3.7 耐盐指数 耐盐指数做为苜蓿芽苗期耐盐性评价的综合指标，是指供检品种相对耐盐指标之和与对照品种相对 耐盐指标之和的比值。 4 耐盐性鉴定方法 4.1 鉴定准备 4.1.1 培养器皿的选择 采用长12 cm宽8 cm高4 cm的塑料盒为培养器皿，使用前要求培养盒洁净。 4.1.2 种子选择与前处理 4.1.2.1 种子选择 种子选取符合GB/T 2930.1的要求，混合充分随机选取；种子质量应符合GB/T 2930.2、GB/T 2930.4 的规定。每盒鉴定种子用量50粒，3次重复。 4.1.2.2 种子的前处理 播前种子做预处理，以打破其休眠。一般种子播前暴晒2 d～3 d，当年收获的种子暴晒3 d～5 d。 种子消毒符合DB13/T 945—2008中规定：在完成种子休眠处理后，在70％酒精中浸泡30 s后，用 40％的次氯酸钠（Na3ClO）溶液消毒30 min，无菌水清洗4次～5次，晾干备用。 4.1.3 培养基质的制备 选择粒径为1 mm的蛭石作为培养床。蛭石在试验前100℃高温灭菌2 h。 4.1.4 营养液和鉴定盐溶液的制备 营养液选用1/2剂量日本园试通用配方营养液，配方见附录A。在营养液中加入NaCl,配置成浓度为 0.7％、0.9％和1.1％的盐溶液（培养液），并选择不加NaCl的营养液作对照。 4.2 4.2.1 鉴定方法 播种 将 85 g 的蛭石培养基质装入培养盒中，高约 3 cm；浇入 80 ml 的培养液，压实压平；将经过预处 理的种子 50 粒均匀摆放在培养基质上；称 10 g 蛭石培养基质均匀覆盖表面，压实压平。 4.2.2 培养 在光照培养箱中培养，温度在20°±1°C之间，出苗后要求用光强（6 000～7 000）LuX，16 h /8h/d 的光照处理。每48 h称重，补充缺失的营养液。补充营养液时将称量好的营养液沿培养盒壁缓缓加入。 定期观察发芽、出苗及生长情况。鉴定培养30 d后进行耐盐性状鉴定评价。 5 耐盐性评价 5.1 性状统计值的调查与计算 2 DB13/T 1472—2011 5.1.1 性状调查 5.1.1.1 发芽率 培养第10 d调查发芽数，计算相对发芽率，发芽符合GB/T 2930.4中发芽试验的规定。 5.1.1.2 活苗数 第30 d调查生长良好的幼苗数量。 5.1.1.3 干重 第30 d随机取10株幼苗烘干，称量干重，计算相对干重。 5.1.1.4 苗高 第30 d调查，幼苗高度从分根点到幼苗最高点距离。计算幼苗相对高度。 5.1.1.5 幼根长 第30 d调查，根长为分根点到最长根部，计算相对幼根长。 5.1.2 统计值的计算 连续培养30 d，统计在0.7％盐浓度下的相对发芽率、相对活苗数和相对干重；在0.9％盐浓度下的 相对苗高；1.1％盐浓度下的相对幼根长。计算方法如下： a) 相对发芽率：发芽第 10 d 统计在 0.7％盐浓度下，处理发芽数与对照发芽数的比值。 b) 相对活苗数：培养第 30 d 统计 0.7％盐浓度下存活苗数，计算活苗数与供检种子数的比值为 相对活苗数。 c) 相对干重：幼苗第 30 d 在 0.7％盐浓度下，称量 10 株幼苗干重，计算处理幼苗干重与对照幼 苗干重的比值。 d) 相对苗高：幼苗第 30 d 在 0.9％盐浓度下，测 10 株幼苗高度，计算处理幼苗高度与对照幼苗 高度的比值。 e) 相对幼根长：幼苗第 30 d 在 1.1％盐浓度下，测 10 株幼苗根长，计算处理幼苗根长与对照幼 苗根长的比值。 5.2 耐盐性评价 5.2.1 耐盐计算 根据调查统计结果，将各相对值相加，计算耐盐指数A。按式1计算： 供检品种（相对发芽率+相对活苗数+相对干重+相对苗高+相对幼根长） 耐盐指数(A)= ………………（1） 对照品种（相对发芽率+相对活苗数+相对干重+相对苗高+相对幼根长） 5.2.2 分级标准 根据耐盐指数将苜蓿的耐盐性分为5个等级，等级划分见表1。 3 DB13/T 1472—2011 表1 苜蓿耐盐分级标准 级别 耐盐指数（A） 耐盐性 1 A≥1.1 强 2 1.0≤A＜1.1 较强 3 0.9≤A＜1.0 中等 4 0.8≤A＜0.9 较弱 5 A＜0.8 弱 4 DB13/T 1472—2011 AA 附 录 A （规范性附录） 日本园试通用配方营养液的配置 A.1 日本园试通用配方营养液元素配方 日本园试通用配方营养液元素配比如表A.1所示： 表A.1 A.2 日本园试通用配方营养液元素配方表 无机盐类 1 000 升水用量(克) 硝酸钙 Ca(NO3)24H2O 950 硝酸钾 KNO3 810 磷酸二氢铵 NH4H2PO4 155 硫酸镁 MgSO4·7H2O 500 螯合铁 Fe-EDTA 25 硫酸锰 MnSO4·4H2O 2 硼酸 H3BO3 3 硫酸锌 ZnSO4·4H2O 0.22 硫酸铜 CuSO4·5H2O 0.05 钼酸铵 (NH4)2MoO4 0.02 母液配置方法 配置营养液一般先配置浓缩母液（在此配置A、B、C三母液），然后再配置成使用浓度，配方如 下： A为硝酸钙Ca(NO3)24H2O +硝酸钾 KNO3 浓缩100倍。 B为磷酸二氢铵 NH4H2PO4 +硫酸镁 MgSO4•7H2O 浓缩100倍。 C为螯合铁 Fe－EDTA +硫酸锰 MnSO4•4H2O+硼酸 H3BO3 +硫酸锌 ZnSO4•4H2O +硫酸铜 CuSO4 •5H2O +钼酸铵 (NH4)2MoO4 浓缩1 000倍。 5