ICS 65. 020. 30 B 41 DB1 3 冫pi 卜』 丬． 、．．r J 省 地 标 、 万 嘴七 I 比 DB 13/ T 1215- 2010 狐狸人工授精技术规程 2010-04-19发布 河d 匕省质量技术监督局 2010-05-04实施 发布 DB13/ T 1215- 2010 月 1 舀 本标准按照GB1. 1-2009给出的规则起草。 本标准由河北省畜牧兽医局提出。 本标准起草单位：沧州市农牧局、肃宁农业局、肃宁县泰信养殖有限公司、沧州金恩养殖有限公司、 肃宁县付佐东村养殖供精站。 本标准主要起草人：陈玉升、刘桂艳、靳会珍、高俊梅、王航明、陈芳、吴争鸣、刘振华、孙铁轮、 黄同九、代景德、王玉兰、张申、严卫。 DB13/ T 1215- 2010 狐狸人工授精技术规程 范围 本标准规定了狐狸人工授精设施设备、采精、精液处理和输精。 本标准适用于养狐场、人工授精站（点）对狐狸的人工授精。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 18596畜禽养殖业污染物排放标准 3设施设备 3. 1采精室 3. 1.，位于饲养区上风向，距养殖区保持适当距离，并设隔离墙。 3.1.2面积16m“一24m2，设隔断分外侧采精室、内侧精液处理室两部分，保温、隔音效果良好，门 窗严密，设窗帘。 3.1.3室内粪尿及时清理，地面冲净，晾干，开窗通风，然后用紫外线灯消毒lh-2 ho 3. 2设备器械 3.2.1保定架 保定架高110 cm-130 cm，平台面用铁丝网制成，距地面80 cm-95 cm，长80cm、宽60cm o 3.2.2主要控温消毒设备 电暖气、保温箱、水浴锅、电冰箱、电烤箱、消毒柜、紫外线灭菌设备、酒精灯和洗涤用容器。 3.2.3采精及精液检测设备 集精杯、精子密度测定仪、显微镜、载玻片、盖玻片、量筒、吸管。 3.2.4输精器械 输精器、阴道导管。 3.2.5其它器械 棉纱缸、消毒盘、垃圾桶。 4 采 精 DB13/ T 1215- 2010 4. 1采精前准备 4.1.1采精员准备 采精员剪净指甲，用肥皂水将手洗净，最后用42¡ã C-45℃清水冲洗干净，带上一次性手套，穿上 工作服。 4.1.2公狐选择 具有本品种特征和种用要求的种狐，并常发出“嗷嗷”的高亢叫声、情绪不安、食欲减退；种狐睾 丸膨大、质地松软而有弹性、下垂到阴囊中；尿频、尿色呈深黄或黄绿色、尿中“狐香”味加浓。 4.1.3器具准备 所有器具先用消毒液洗涤2-3遍，后用蒸馏水冲洗2次，玻璃和金属器材再用电烤箱高温消毒lh2h，然后用紫外线消毒lh-2h。各种采精、输精和精液处理器材使用前放在37℃保温箱内预热。 4.1.4其他准备 室温保持在24℃一25'C. 4. 2采精方法 4.2. 1保定 将公狐置保定架上，助手一手用颈钳保定头部狐狸，另一手握住尾部，使公狐呈站立姿势。 4. 2. 2清洗 采精员用温湿毛巾将公狐跨下及臀部至后腿上部被毛擦湿，然后用浸有0. 2％百毒杀的毛巾对睾丸 及其周围进行消毒。再用温开水或0. 1％洁尔阴对公狐外生殖器开口处和阴部被毛、皮肤进行清洗，最 后用灭菌纱布擦干。 4. 2. 3按摩 采精者用右手拇指、食指和中指握住公狐阴茎球上方，上下轻轻滑动，将勃起的阴茎从两后腿中间 拉向后方，将包皮撸至球状海绵体后方继续按摩，直至公狐射精为止。按摩频率、力度应适宜。 4.2.4精液收集 左手握住集精杯底部随时准备接取精液。公狐射精时，首先射出的是副性腺分泌物，不宜收取， 待射出乳白色精液后及时用集精杯接取。公狐射精过程中仍需对其按摩刺激。整个按摩采精时间需3 mi n' - 5 mi n. 4. 3采精频次 隔天采精1次。 DB13/ T 1215- 2010 5精液处理 5. 1精液品质检验 5.1.1外观检验 精液量 0. 5 ml - l ml o 5.1.1.2颜色 正常精液呈乳白色，不透明。 5.1.1.3气味 正常精液有特殊的腥味，有异味精液不可用于输精。 5.1.2密度活力检验 5.1.2.1精液密度测定可用精子密度测定仪或显微镜，精子密度以每毫升不低于3亿个为宜。 5.1.2.2精子活力的评定在显微镜下靠目力估测，一般采用10级评分标准评定。选择5个视野计数求 其平均值，有效精子占总视野的100％则精子活力评为1, 90％评为0. 9，以此类推。用于人工授精的 精子活力不低于0. 7，畸形精子不高于10%0 5. 2精液稀释 5.2. 1稀释液的准备 精液稀释液使用前进行保存精子活力检查。稀释后检测精子活力不低于0. 7，过2h-3h后无明 显变化，则稀释液质量合格。稀释液用前放入35℃一37℃水浴锅备用。 5.2.2精液稀释 5.2.2.，所用器具都应经过消毒、干燥处理，用前再用少量稀释液冲洗一遍。 5.2.2.2稀释液移至试管内，置于35℃一37℃的水浴锅中。稀释时先按适宜稀释倍数准确量取所需稀 释液，再将稀释液沿集精杯壁缓慢加入到精液中，轻轻摇匀。 5.2.2.3稀释倍数根据原精子活力和密度确定，稀释后有效精子每毫升不低于7000万个。 5. 3及时输精 稀释后精液及时输精，体外保存时间不超过1h0 6 输精 6. 1母狐发情鉴定 6.1.1阴道细胞学检查法 DB13/ T 1215- 2010 用棉签或吸管吸取阴道分泌物制成涂片，在200-400倍显微镜下观察，圆型细胞逐渐减少，角化 细胞逐渐增多为发情前期；角化细胞占满视野，圆型细胞缺少为发情期即适宜输精期；角化细胞减少圆 型细胞又重新出现时为发情后期。 6.1.2外阴观察法 母狐发情期依据外阴变化可分下列五个阶段： a)静止期：外阴部阴毛覆盖，扒开阴毛，外阴只有一条小缝； b)发情一期：阴毛向两边分开，阴门开始裸露、肿胀，无阴道分泌物； c)发情二期：阴门明显肿胀，呈圆形或椭圆形，肿胀面光亮，颜色暗红，触摸时较硬，无弹性； d)发情三期：阴门肿胀面开始消退变软，出现轻微褶皱，并有白色或微黄色乳状分泌物，是适宜 输精期； e)发情后期：阴门肿胀逐渐消退、萎缩，呈灰白色，分泌物减少，黏膜干涩。 6. 2输精准备 6.2. 1输精员准备 同4. 1. 1 6. 2. 2保定 用保定架固定母狐，固定人员一手用保定钳保定母狐，一手握住母狐尾部使尾朝上。 6. 2. 3消毒 用侵有0. 1％一0. 2％新洁尔灭消毒液的湿毛巾对外阴及其周边部位消毒。 6.2.4精液吸取 用注射器缓慢吸取精液lml，再吸入少许空气。 6. 3输精方法 6.3.1输精员将阴道导管插入母狐阴道内，其前端抵达子宫颈；左手虎口部托于母狐下腹部，以拇指、 中指和食指摸到阴道导管前端固定子宫颈位置，右手握持输精器末端顺阴道导管内腔插入，前端抵子宫 颈处调整输精的位置探寻子宫颈口。 6.3.2双手配合将输精器前端轻轻插入子宫内1 cm-2 cm，固定不动。由助手将吸有精液的注射器 插接于输精器上，推动注射器将精液缓慢注入子宫内。熟练者可事先将吸有精液的注射器插在输精器上， 由输精员直接将精液输入，同时固定人员将狐狸尾部向上提起，使头朝下。 6.3.3输精后轻轻拉出输精器。精液逆流严重，应立即补输。 6.4输精次数 每日1次，一般连续输精2-3次。 6.5输精记录 DB13/ T 1215- 2010 做好配种记录。 6. 6废弃物处理 按照GB18596的规定执行。