ICS65.020.20 B05 5404 林芝市地方标准 DB5404/T0004—2023 林芝灵芝标准综合体 第2部分：菌种生产技术规程 2022-12-03发布 2023-01-03实施 林芝市市场监督管理局  发布 DB5404/T0004—2023 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4菌种来源............................................................................1 5场地、设施要求......................................................................1 6原材料要求..........................................................................1 6.1原料............................................................................1 6.2容器............................................................................2 6.3培养原料........................................................................2 7培养基参考配方......................................................................2 7.1一级种..........................................................................2 7.2二级种和三级种..................................................................2 8菌种制做............................................................................2 8.1拌料............................................................................2 8.2装袋............................................................................3 8.3灭菌............................................................................3 8.4冷却、消毒、接种................................................................3 8.5发菌............................................................................3 8.6后熟培养........................................................................3 8.7菌丝生长速度....................................................................4 8.8菌种成熟标准....................................................................4 9入库................................................................................4 DB5404/T0004—2023 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是《林芝灵芝标准综合体》的第2部分，《林芝灵芝标准综合体》已经发布了以下部分： ——第1部分：菌种基本要求； ——第2部分：菌种生产技术规程； ——第3部分：菌袋制作规程； ——第4部分：栽培技术规程； ——第5部分：采收存储技术规范； ——第6部分：分级规范。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由林芝禹翔企业服务中心提出。 本文件由林芝市市场监督管理局归口。 本文件起草单位：西藏自治区产品质量监督检验所、米林县丽云药材种植有限公司、林芝禹翔企业 服务中心。 本文件主要起草人：何天文、洛桑卓玛、罗笑娟、龙莎莎、辛双阳、次仁卓嘎、邵强、次仁罗布、 段金华、赵明。 DB5404/T0004—2023 1林芝灵芝标准综合体第2部分：菌种生产技术规程 1范围 本文件规定了林芝灵芝菌种生产的术语与定义、菌种来源、场地、设施要求、原材料要求、培养基 参考配方、菌种制作、入库等。 本文件适用于林芝市灵芝菌种的培育。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T191包装储运图示标志 GB/T4456包装用聚乙烯吹塑薄膜 GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求 GB/T12728食用菌术语 GB5749生活饮用水卫生标准 NY/T528食用菌菌种生产技术规程 NY/T1742食用菌菌种通用技术要求 NY5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求 3术语和定义 GB/T12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 4菌种来源 林芝灵芝以国家地理标志保护产品林芝灵芝产地范围内的林芝市巴宜区、米林县、工布江达县、波 密县、察隅县、朗县、墨脱县共7个县（区）现辖行政区域为中心，采集的野生白肉灵芝（Ganoderma leucocontextum）驯化培育的菌种。 5场地、设施要求 应符合NY/T528的要求。 6原材料要求 6.1原料 6.1.1栽培袋符合GB/T4456的要求。 6.1.2培养基原料应符合NY5099的要求。 DB5404/T0004—2023 26.1.3栽培基配制用水应符合GB5749的规定。 6.1.4一级种需经出菇试验确认农艺性状和商品性状等种性合格。 6.2容器 6.2.1一级种使用18mm×180mm或20mm×200mm的玻璃试管或培养皿。 6.2.2二级种、三级种使用750mL或以下，耐121℃-126℃及以上高温高压的无色或近无色的、瓶 口直径≤4cm的玻璃瓶或近透明的耐高温塑料瓶，或（13cm～17cm）×（26cm～33cm）耐121℃-126℃ 高温高压的聚丙烯塑料袋，各类容器都应使用能满足滤菌和透气要求的无纺布塑料盖。 6.3培养原料 6.3.1化学试剂类要使用化学纯或以上级别的试剂。 6.3.2生物制剂和天然材料类材料要新鲜，无虫、无螨、无霉、洁净、干燥。 7培养基参考配方 7.1一级种 以1000mL计： a)木屑PDA培养基马铃薯（去皮、切块或片）200g，杂木屑20g，葡萄糖20g，琼脂20g， 水1000mL，pH自然。 b)PDA培养基马铃薯（去皮、切块或片）200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH自 然。 c)综合PDA（CPDA）培养基马铃薯（去皮、切块或片）200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，磷 酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，琼脂20g，维生素B110mg，水1000mL，pH自然。 7.2二级种和三级种 以100g干料计： a)玉米（小麦、高粱）98g，轻质碳酸钙1g，硫酸钙1g。高粱（或玉米、小麦）浸泡12h-24 h时，煮熟至掰开无白心，沥去多余水分，晾干表面水分，混合轻质碳酸钙和硫酸钙拌匀，pH 自然。 b)杂木屑77g，麸皮17g，玉米粉3g，轻质碳酸钙2g，硫酸钙1g，加水至培养料含水量 60%，pH自然。 c)玉米芯颗粒77g，麸皮17g，玉米粉3g，轻质碳酸钙2g，硫酸钙1g，加水至培养料含水 量60%，pH自然。 8菌种制做 工艺流程 备料→拌料→装袋→灭菌→冷却→接种→培养。 8.1拌料 将培养基按本规范第7章的配方比例称取，拌匀，并掌握好PH值。代料以用手紧握培养料成团，松 开后龟裂，手掌有微量水迹为准（含水量60%～65%）。 DB5404/T0004—2023 38.2装袋 用长33cm、宽17cm、厚0.